检测表明 ,莲子仓贮的主要危害是青霉、米曲霉引起的霉变和象鼻虫蛀。采用γ射线辐照,可减少污染并延长莲子的贮存期。
莲子盛产于湖南、湖北、江西等省,含丰富蛋白质,是我国传统出口商品。莲子在贮藏中,易受虫蛀和霉变。传统贮藏方法多喷以化学药剂,或用氯化苦熏蒸。由于化学药剂均有一定毒害,为此,以γ射线辐照,进行了灭菌与杀虫试验。
方 法
一、莲子污染的检测
先进行污染量的测定, 然后再做菌株的分离鉴定。污染菌量测定时 , 取适量莲子 , 加入装有玻璃珠和100ml 生理盐水并预先经压力蒸汽灭菌的500ml三角瓶中。振摇10-15 分钟 , 制成待测洗液。取lml 洗液, 用无菌生理盐水按10倍递增稀释法进行稀释。根据对被检样含菌数的估计 , 选择 3个适宜的稀释度 ,各吸1ml 置于灭菌平皿中, 作琼脂倾注接种 , 每个稀释度接种 3个平皿 。对细菌用普通营养肉汤琼脂培养基 , 对真菌用 土豆蔗糖琼脂培养基。接种后的平皿置 28 ~ 30℃ 恒温箱中培养 。2-3 天后计数菌落, 求 出莲子的污染菌量。
对检出微生物进行分类时, 将计数后的平皿 , 选各种形态菌落 , 分别传接斜面。于28- 30℃培养一周后 , 染色镜检并根据其形态与培养特性进行分类。
二、微生物对γ射线敏感性试脸
取被试菌斜面 , 稀释成菌悬液 。对细菌芽胞悬液 , 于 70℃ 加热30 分钟杀死其繁殖 体 。将经γ射线辐照灭菌过的莲子 , 浸以菌悬液并分装于食品塑料袋内热封 , 每袋250 g。将上述染菌的莲子连同塑料袋进行不同剂量的辐照处理 , 井按上述倾注培养法测定其存活菌数。
三、虫害检测
在已发生虫蛀的莲子中 , 挑选体形大小相近的活的成虫和幼虫 , 分装在玻璃指形管中 , 每管 50 条。辐照后 , 取出活虫, 用莲子喂养 , 定期观察虫的存活情况 。
结 果
一、莲子微生物含量
将霉变莲子分为两组,一组为肉眼可见明显霉变样品,另一组为肉眼未见明显霉变样品, 经分别测定所含微生物数量。结果,两组之间真菌的数量相差较多 (表1) 。所以,我们认为 真菌是引起莲子霉变的主要微生物。
二、莲子所含主要微生物分类
由霉变莲子分离获得的微生物主要为丝状真菌和细菌,仅有少量放线菌及酵母菌。根据所获真菌的形态与培养特性,初步判断莲子表面有青霉、曲霉、卵形抱霉、芽枝霉、串珠霉、交链孢霉、 脉孢霉、 根霉、葡萄抱霉等属真菌数十种 。其中, 以青霉为最多, 约占真菌总数的 26% ,其次为曲霉,占真菌总数的13 % 。曲霉中又以米曲霉为主 , 约占曲霉总数的 43 % 。
将霉变莲子置三角瓶内, 加适量无菌生理盐水 , 在室温下放置数日 , 可见到莲子表 面布满青霉与米曲霉 。此现象进一步证明 , 引起莲子霉变的主要微生物为青霉和米曲霉。
由莲子表面分离到的细菌主要为芽胞杆菌, 其次为八叠球菌。
三、引起莲子霉变主要微生物对γ射线的敏感性
测定了所分离出引起莲子霉变的3 种主要微生物, 即青霉、 米曲霉与芽胞杆菌芽胞的存活数与电离辐射吸收剂量的关系(表2) , 并以吸收剂量为横坐标 , 活菌数对数为纵坐标作存活曲线图。青霉与米曲霉的曲线均为一下降直线 ( 图l ) , 而细菌芽胞的则呈抛物线 状 ( 图 2) 。
以上结果表明, 米曲霉对辐射敏感, 青霉次之 , 而芽胞杆菌芽胞对辐射的耐受力极强。芽胞杆菌芽胞的存活曲线呈抛物线 , 可能因其抗性较强,对低剂量处理有一定自身修复能力, 致使存活曲线在开始的低剂量段下降缓慢 。
四、杀虫效果
莲子的主要害虫为鞘翅目象甲科中的象鼻虫。该虫的幼虫和成虫的急性致死剂量, 经测定分别为 1.5 kGy 和2.0 kGy。未经辐照的成虫 , 观察到100 天仍然全部存活,而用1.5 kGy 辐照后的成虫 , 在第 8 天全部死亡。
结 语
经检测表明, 莲子贮藏引起霉变的主要微生物为青霉和米曲霉 , 主要虫害是象鼻虫。用γ射线处理 , 当吸收计量 为2.97 kGy时,可将莲子上的青霉从1.24×cfu/g减少到7.2×cfu/g,当吸收剂量为2.64 kGy 时, 可将米曲霉从6.80×cfu/g减少到1.3×cfu/g。芽胞杆菌芽胞的抗力较强, 吸收剂量为5.83 kGy 时 ,始可将其从 1.75×cfu/g减为5×cfu/g。对于象鼻虫幼虫的急性致死剂量为1.5 kGy , 成虫为 2.0 kGy 。用 5 kGy 剂量照射布袋装莲子, 经仓库贮存3年未见霉变与虫蛀。
3秒钟实现冻融肉鉴别:中国检验检疫科学研究院融合食品组学和质谱技术